一、输液系统故障（高频，影响流动相输送）
1. 压力异常（压力过高 / 过低 / 波动）
故障现象 | 可能原因 | 排查与解决步骤 |
压力突然升高（超过正常范围 50% 以上） | 1. 色谱柱堵塞（流动相污染、样品残留）；2. 管路堵塞（过滤白头堵塞、单向阀污染）；3. 流动相粘度大（如高比例乙腈 / 缓冲盐低温下） | 1. 断开色谱柱，用两通替代，若压力恢复正常→柱子堵塞，需用合适溶剂反向冲洗（如反相柱用甲醇 - 水梯度冲洗）；2. 若压力仍高→检查管路：拆过滤白头（入口单向阀处），用甲醇超声清洗，或更换新白头；3. 冬季可将流动相恒温至 25℃，降低粘度。 |
压力过低（接近 0 或无压力） | 1. 流动相不足（溶剂瓶空、管路进气）；2. 单向阀泄漏（密封圈老化、有气泡）；3. 泵头密封垫磨损 | 1. 检查溶剂瓶液位，若管路进气→打开排液阀，用 “Purge" 功能冲洗泵头，排出气泡；2. 拆下单向阀，用甲醇超声 10 分钟（避免用超声清洗密封圈），晾干后重装；3. 若仍泄漏→更换泵头密封垫（安捷伦配件号如 G1311-68701）。 |
压力波动（忽高忽低） | 1. 流动相中有气泡（混合溶剂脱气不充分）；2. 单向阀污染；3. 比例阀故障（梯度洗脱时） | 1. 开启在线脱气机（若有），或手动摇晃流动相瓶排气后超声脱气；2. 按 “压力过低" 步骤清洗单向阀；3. 梯度模式下，切换至等度模式测试，若波动消失→比例阀需校准（用安捷伦 ChemStation 软件执行 “比例阀校准"）。 |
2. 流动相输送异常（漏液 / 梯度偏差）
漏液位置与解决：
溶剂瓶接口漏液：管路接头松动→重新拧紧；接头老化→更换 PEEK 接头（避免过紧导致开裂）。
泵头漏液：密封垫磨损→更换密封垫；排液阀未关紧→顺时针拧紧排液阀旋钮（勿过度用力）。
柱温箱内漏液：色谱柱接头松动→用扳手轻轻拧紧（反相柱常用 10-15N・m 扭矩）；柱子两端筛板破损→更换色谱柱筛板。
梯度偏差（保留时间漂移）：
原因：比例阀污染、流动相混合不均；
解决：用异丙醇冲洗比例阀（执行 “比例阀冲洗" 程序），混合溶剂需提前手动摇匀后再倒入溶剂瓶。
二、进样系统故障（影响进样准确性）
1. 进样针相关问题
故障现象 | 可能原因 | 解决步骤 |
进样针堵塞（无法吸液 / 推液） | 1. 样品中有颗粒物（未过滤）；2. 样品残留（如蛋白、强极性物质） | 1. 用 50% 甲醇 - 水超声清洗进样针（超声时间≤5 分钟，避免损坏针芯）；2. 若堵塞严重→用细钢丝通针（安捷伦专用通针工具，勿用普通钢丝划伤针内壁）；3. 后续样品需经 0.22μm 滤膜过滤。 |
进样针漏液（吸液后滴液） | 1. 针芯磨损；2. 进样针与进样阀接口不匹配（如用错规格针） | 1. 更换进样针（安捷伦 1260 进样针常用型号如 G1329-20530）；2. 确认进样针规格：手动进样阀用 25μL/100μL 针，自动进样器需匹配对应型号（如 1290 自动进样器用 G4226-68700）。 |
2. 自动进样器故障
进样后无峰 / 峰面积变小：
原因：进样阀转子污染、进样量设置错误；
解决：拆开进样阀转子，用甲醇超声清洗（转子材质为 PEEK，避免接触强酸碱）；检查软件中 “进样量" 参数是否与方法一致（如误设为 1μL 而非 10μL）。
进样器卡针（机械臂不动）：
原因：进样针未放回正确位置、机械臂轨道有异物；
解决：手动将进样针放回针座，清除轨道上的灰尘 / 废液，重启自动进样器（关闭电源后 30 秒再开机）。
三、检测系统故障（影响信号采集）
1. 紫外检测器（UV/VWD）常见问题
故障现象 | 可能原因 | 解决步骤 |
基线漂移（缓慢上升 / 下降） | 1. 流动相未平衡（新换流动相后）；2. 检测器灯能量不足（寿命到期）；3. 流通池污染 | 1. 让流动相持续冲洗系统（通常需 30-60 分钟，基线漂移≤0.01mAU/h 为正常）；2. 查看灯能量：在 ChemStation 软件中 “检测器→灯能量"，若能量低于初始值 50%→更换氘灯（安捷伦氘灯型号如 G1314-60100）；3. 清洗流通池：用 10% 硝酸 - 水、甲醇依次冲洗， each 溶剂冲洗 10 分钟。 |
基线噪音大（杂峰多） | 1. 流动相污染（溶剂纯度不够，如用 AR 级替代 HPLC 级）；2. 流通池有气泡；3. 电源干扰（如靠近离心机） | 1. 更换 HPLC 级溶剂，新流动相需超声脱气 20 分钟；2. 打开检测器排液阀，用注射器从流通池出口抽气，或执行 “流通池排气" 程序；3. 将仪器远离强电磁干扰设备，检查电源接地是否良好。 |
无信号输出（基线为 0） | 1. 检测器未开启（灯未点亮）；2. 信号线缆松动（检测器与工作站连接）；3. 流通池堵塞（无流动相通过） | 1. 在软件中开启检测器灯（“检测器→灯控制→开启"）；2. 检查检测器背面信号线缆，重新插拔并拧紧；3. 断开流通池入口管路，用注射器推液，若推不动→清洗流通池（同 “基线漂移" 步骤）。 |
2. 示差折光检测器（RID）故障
基线不稳定（波动大）：
原因：柱温 / 检测池温波动（温差＞0.1℃）、流动相折射率变化；
解决：确保柱温箱与 RID 检测池温度一致（如均设为 30℃），流动相需一次性配制足量，避免分次配制导致折射率差异。
四、柱系统故障（影响分离效果）
1. 色谱峰异常（峰形差 / 保留时间漂移）
故障现象 | 可能原因 | 解决步骤 |
峰拖尾（拖尾因子＞1.5） | 1. 色谱柱柱头污染（样品残留）；2. 流动相 pH 不合适（如碱性样品用酸性流动相）；3. 柱子老化（柱效下降） | 1. 反向冲洗色谱柱（如反相柱用甲醇 - 乙腈 - 甲醇梯度冲洗，流速 1mL/min，冲洗 30 柱体积）；2. 调整流动相 pH：碱性样品添加 0.1% 三乙胺，酸性样品添加 0.1% 磷酸；3. 若柱效下降＞30%→更换新色谱柱。 |
峰分裂（单峰变双峰） | 1. 进样量过大（超过柱子容量）；2. 柱子柱头塌陷（填料流失）；3. 样品溶剂与流动相不兼容（如用纯甲醇溶解样品，流动相为水 - 乙腈） | 1. 减少进样量（如从 20μL 减至 10μL）；2. 检查柱子柱头：若填料凹陷→更换柱头筛板或报废柱子；3. 更换样品溶剂，使其与流动相比例一致（如用 50% 水 - 50% 乙腈溶解样品）。 |
保留时间漂移（每次进样相差＞2%） | 1. 流动相比例变化（溶剂挥发，如甲醇易挥发）；2. 柱温波动；3. 柱子平衡不充分 | 1. 密封溶剂瓶（用带透气膜的瓶盖），每天更换新鲜流动相；2. 检查柱温箱温度是否稳定（波动≤0.5℃）；3. 新柱子或长时间未用的柱子，需用流动相冲洗 60 分钟以上再进样。 |
2. 色谱柱堵塞（压力高 + 峰面积变小）
解决：用 “低流速反向冲洗"：反相柱用甲醇 - 水（90:10），流速 0.2mL/min，冲洗 12 小时；正相柱用正己烷 - 异丙醇（90:10），避免用含水溶剂。
五、日常维护要点（减少故障概率）
流动相管理：
仅用 HPLC 级溶剂，缓冲盐（如磷酸二氢钾）需用超纯水配制，配制后 24 小时内使用（避免微生物滋生）。
每天实验结束后，用 10% 甲醇 - 水冲洗系统 30 分钟（反相柱），正相柱用正己烷冲洗，防止盐结晶或样品残留。
部件定期更换：
泵头密封垫：每 3000 小时更换一次；
氘灯：每 2000 小时或能量不足时更换；
过滤白头：每 1000 小时或压力升高时更换。
软件维护：
每周执行一次 “系统性能测试"（如测试柱效、压力稳定性）；
每月备份方法文件和数据，避免软件崩溃导致数据丢失。
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